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本试剂盒采用新型质粒DNA提取技术，只需要一种溶液处理即可以完成细菌裂解，并且裂解物可以直接上柱纯化质粒DNA。提取得到的质粒DNA可以直接用于电泳、酶切、PCR、细菌转化、分子克隆、测序等实验。

• 一步式，提取一个样品只需10分钟左右，比传统的碱变性方法快捷。
  
• 质粒DNA产量跟经典碱变性法相当，一般1～5mL可以得到3～15μg（对低拷贝质粒）和5～35μg（对高拷贝质粒）。
  
• 适用于高拷贝、中拷贝和低拷贝质粒的提取。
  
• 适用于各种大肠杆菌宿主菌。
  
• 所得质粒DNA呈超螺旋结构的比例比碱变性法更高。
  
• 基因组DNA污染少。
  
• 由于操作太快，溶液中的RNase来不及降解RNA，一般会有少量RNA污染，但不影响后续实验。

• 用塑料离心管收集0.5～5mL过夜培养的饱和新鲜菌液，室温14000g离心半分钟，弃上清（培养基）。
  
  • 可以使用-20℃冻存的细菌沉淀和4℃放置过夜的细菌培养液，但后者的质粒回收效率较低。
• 在细菌沉淀中加入0.6mL超快质粒DNA纯化溶液A，充分吹打或振荡裂解细菌直到裂解变澄清，一般需要半分钟左右。
  
  • 此方法不同于碱裂解法，此步需要充分吹打，使基因组DNA断裂。
• 将裂解液全部转移到离心吸附柱中，直接离心。如果静置3～5分钟充分裂解细菌后再离心，则质粒回收率将提高10%左右。
  
• 室温14000rpm离心1分钟，弃穿透液。一般菌液越多裂解液越稠，需要离心的时间就越长，所以不建议使用超过5mL的起始菌液。如果离心1分钟后还有少量液体在离心柱中残留，可以适当延长离心时间直到所有液体成功过柱。有的离心机标注的离心速度跟实际的速度不符合，这种情况下，可以使用离心机的最大离心速度离心。
  
• 在离心吸附柱中加入0.7mL的专用洗柱液，室温14000rpm离心半分钟，弃穿透液。
  
• 如果需要，可以再在离心吸附柱中加入0.3mL的专用洗柱液，室温14000rpm离心半分钟，弃穿透液。此步可以降低RNA污染，但由于RNA污染并不影响后续实验，为了快捷，一般可以跳过此步。
  
• 室温14000rpm离心半分钟，甩干残留液体。
  
  • 此步不能省略，否则残留洗柱液会影响后续的电泳上样（DNA沉不到加样孔里去）和酶反应。
• 将离心柱置于一个自备的1.5mL塑料离心管中，加入50μL DNA洗脱液。
  
• 室温14000g离心半分钟，离心管底溶液即质粒DNA，可以直接用于后续实验（浓度测定、酶切、电泳和测序）或放冰箱长期保存。一般1～5mL菌液可以得到3～15μg（对低拷贝质粒）或5～35μg（对高拷贝质粒）质粒DNA。
  
• 本方法得到的质粒DNA一般足够各种后续实验。如果需要进一步提高质粒DNA产量，可以再加30～50μL DNA洗脱液2.0到离心吸附柱中再次洗脱，可以得到相当于第一次洗脱量10～20%的质粒DNA。也可以将第一次洗脱得到的质粒DNA溶液再加到离心吸附柱中洗脱，可以使质粒DNA产量提高10～20%。

• 因为没有使用剧烈的碱变性步骤，所以质粒呈现天然的超螺旋结构的比例较大。
  
• 由于整个操作非常快速，又没有使用碱来降解RNA，所以试剂中的RNase都来不及把细菌的内源RNA彻底降解，故所得质粒比碱变性法提取的质粒有更多的RNA污染，因此不建议使用测OD的方法确定质粒DNA的浓度，故最好采用电泳比较法，即通过比较质粒DNA跟浓度已知的DNA marker的相对亮度来确定质粒的浓度。注意：RNA污染一般不影响电泳、酶切和测序。
  如果需要彻底去除RNA污染，则需要在每次加入专用洗柱液后，室温放置2～5分钟，让其含有的RNase充分降解结合在膜上的RNA，离心时降解成小片段的RNA就穿透到收集管，结合在膜上的DNA就更纯净。